弓形虫Rhomboid-IL-2基因重组卡介苗的构建及其对犬的免疫效果

摘要：

目的 构建弓形虫Rhomboid以及犬白介素2基因重组卡介苗,并观察其对免疫犬的免疫效果. 方法 将鉴定正确的弓形虫Rhombiod基因和犬IL-2基因一起克隆到大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达载体和整合表达载体中,构建重组质粒pMV261(361)-IL2-Rho.将重组质粒转入卡介苗中,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析及Western blot鉴定.分别用重组卡介苗pMV261(361)-IL2-Rho和pMV261 (361)-Rho经皮下免疫犬,检测免疫犬体液及细胞免疫水平变化并观察其存活时间. 结果 成功构建pMV261(361)-IL2-Rho重组质粒,弓形虫Rhomboid基因在重组卡介苗中稳定表达46 ku的目的蛋白,Western blot显示该蛋白能被弓形虫感染鼠血清识别.动物实验表明,rBCGpMV261(361)-IL2-Rho能诱导产生较强的体液免疫和Th1型细胞免疫应答反应,rBCGpMV361-IL2-Rho免疫组感染弓形虫后的存活时间组为(14.40±4.50)d,rBCGpMV261-IL2-Rho免疫组感染弓形虫后的存活时间组为(13.00±4.75)d,较BCG对照组存活时间(8.20±5.45)d有所延长. 结论 rBCGpMV261 (361)-IL2-Rho蛋白具有免疫原性.该重组卡介苗对犬弓形虫感染有一定保护效果.

关键词：弓形虫、Rhomboid基因、白介素2、rBCG

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分类号：R382.5(医学寄生虫学)

资助基金：国家公益性行业农业科研专项No.201303042;吉林省科技发展计划项目No.20130206023NY.

在线出版日期：2016-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：710-714