新型布尼亚病毒环介导等温扩增可视化检测方法的建立

摘要：

目的 应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立新型布尼亚病毒(SFTSV)可视化快速检测方法. 方法 针对新型布尼亚病毒的S片段基因设计LAMP引物建立LAMP方法.反应体系内加入染料羟基萘酚蓝(HNB)作为反应扩增指示剂,根据LAMP浊度仪扩增结果优化反应条件,根据HNB颜色变化进行结果判定,评估LAMP方法的特异性和灵敏性. 结果 建立的LAMP方法最低检出限为10拷贝/反应管;方法的特异性高,仅SFTSV反应管颜色由紫罗兰变为天蓝色,而汉坦病毒、新疆出血热、Q热、马尔堡、埃博拉病毒及阴性对照反应管均未发生变色反应;LAMP反应的最佳温度为63 ℃,其扩增效率高于常规PCR,试验过程仅需30 min. 结论 建立的可视化SFTSV LAMP检测方法具有特异性强,灵敏性高,实验设备要求简单等优点,可用于SFTSV的快速检测.

关键词：新型布尼亚病毒(SFTSV)、可视化检测、环介导等温扩增(LAMP)、羟基萘酚蓝(HNB)

所属期刊栏目：11

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家重大传染病专项课题No.20013ZX10004-008,2013ZX10001001-004;全军青年培育项目No.13QNP051;江苏省科技支撑计划社会发展项目No.BE2012609.

在线出版日期：2016-06-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：225-228