PC-12神经元作为海分枝杆菌感染宿主的实验研究

摘要：

目的 研究海分枝杆菌感染PC-12神经元细胞的感染潜能及其诱导促炎性细胞因子表达的免疫特性. 方法 用海分枝杆菌感染神经营养因子(nerve growth factor,NGF)诱导分化的PC-12神经元,采用激光共聚焦显微镜观察细菌在PC-12神经元细胞内的定位分布,并计数细菌的菌落形成单位(CFU)以观察其在PC-12神经元细胞内的增殖情况;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)及免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白介素(Interleukin)-1β、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和环氧合酶(cyclooxygenase-2,COX-2)mRNA及蛋白的表达情况. 结果 海分枝杆菌感染PC-12细胞后,激光共聚焦显微镜观察细菌侵入PC-12神经元胞浆内并进行增殖.当细菌以MOI=20感染神经元细胞时,感染后24 h与感染后6 h相比,细菌在细胞内增殖了约25倍.同时海分枝杆菌感染后6h即可诱导促炎性分子TNF-α、IL-1β、iNOS和COX-2的mRNA表达明显增加,感染24h后TNF-α 、IL-1β、iNOS和COX-2的蛋白表达也明显增加. 结论 PC-12能够作为海分枝杆菌感染的宿主细胞,并引起促炎相关因子的分泌,从而促进炎症反应.

关键词：PC-12、海分枝杆菌、宿主、炎症

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分类号：R378.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金项目No.81201252;江苏高校优势学科建设工程资助项目No.PAPD;江苏省自然科学研究项目14KJD180002,13KJB310013;南通市科技计划项目No.HS2012059,BK2014033.

在线出版日期：2015-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：875-878