耶氏肺孢子菌主要表面糖蛋白合成及人群IgG抗体调查

摘要：

目的 原核表达耶氏肺孢子菌(Pneumocystis jirovecii,Pj)主要表面糖蛋白(major surface glycoprotein,Msg)氨基端片段,获得可溶性Pj重组Msg抗原(recombinant Msg,rMsg),利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测266例成年人外周血抗Pj rMsg IgG抗体. 方法 从耶氏肺孢子菌感染者的痰液获得Pj DNA,构建表达载体pGEX-3X-Pj Msg,转化感受态大肠埃希菌DE3,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达.利用谷胱甘肽转移酶(GST)标签进行亲和纯化,对纯化Pj rMsg抗原进行鉴定并建立ELISA方法,检测266例成年人外周血抗Pj rMsg IgG抗体. 结果 成功构建了表达质粒pGEX-3X-Pj Msg,并诱导表达分子质量单位约39 ku的可溶性Pj rMsg蛋白,产量为13 mg/500ml菌液,以此为抗原,采用ELISA检测266例成年人外周血抗Pj rMsg IgG抗体,阳性率为42.5％(113/266).其中男、女性患者阳性率分别为43.3％(58/134)和41.7％(55/132),差异无统计学意义(x2=o.071,P＞0.05);20～29岁、30～39岁、40～50岁组阳性率分别为31.8％(27/85)、48.3(42/87)和46.8％(44/94),差异无统计学意义(x2=5.911,P＞0.05). 结论 成功表达了可溶性Pj rMsg抗原,Pj rMsg-ELISA检测结果表明北京地区成人耶氏肺孢子菌感染率较高.

关键词：耶氏肺孢子菌、主要表面糖蛋白、重组抗原、抗体

所属期刊栏目：9

分类号：R379.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2014-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：318-321,326