一种改良的恶性疟原虫核蛋白和胞浆蛋白分离方法的建立
目的 建立一种改良的恶性疟原虫核蛋白和胞浆蛋白分离方法,并对分离的蛋白组分进行分析和鉴定. 方法 分别用含不同盐浓度的裂解缓冲液和不同研磨次数提取核蛋白和胞浆蛋白,并利用针对不同组分特异性蛋白的抗体进行Western blot,分析分离效果. 结果 含50 mmol/L NaCl的裂解缓冲液和研磨100~150次为分离核蛋白和胞浆蛋白最佳条件,恶性疟原虫醛缩酶胞浆蛋白和组蛋白3核蛋白的抗体Western blot、抗GFP抗体Western blot及活细胞免疫荧光检测均表明该方法效果良好. 结论 建立了一种快速、有效的恶性疟原虫核蛋白和胞浆蛋白的分离方法(裂解液盐浓度为50 mmol/L,研磨100~150次),为研究恶性疟原虫蛋白的胞内分布以及蛋白质/蛋白质/核酸相互作用提供了重要的技术手段.
疟原虫,恶性、核蛋白、胞浆蛋白
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R382.31(医学寄生虫学)
国家自然科学基金项目31271388;中央高校基本科研业务费专项资金
2013-11-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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