HepG2细胞表达蛋白HCV C体外活化肝星状细胞的研究
目的 观察HCV核心蛋白对肝星状细胞活化及合成细胞外基质的影响,为进一步研究HCV核心蛋白的致肝纤维化机制提供实验依据. 方法 采用双抗体夹心ELISA检测HepG2-HCV-C细胞株培养液中TGF-β1的表达.用HepG2 HCV-C和HepG2两株细胞培养5d的上清液培养人肝星状细胞系LX-2细胞,同时用DMEM培养LX-2细胞作对照,分别制备细胞爬片,采用免疫细胞化学染色(ICC)法检测LX-2细胞中人α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)、结缔组织生长因子(CTGF)和纤维连接蛋白(FN)的表达;采用双抗体夹心ELISA检测LX-2细胞1～6 d培养上清液中人ColⅣ、Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)、透明质酸(HA)和人层粘连蛋白(LN)的表达.所有数据采用SPSS11.0统计软件进行统计分析. 结果 双抗体夹心ELISA检测HepG2-HCV-C细胞1～6 d培养液中的TGF-β1量为(110.00±11.45) pg/ml～(935.00±21.36) pg/ml,HepG2细胞为0～(124.16±11.81) pg/ml,差异有统计学意义(F=21984.81,P＜0.01).ICC检测用HepG2-HCV-C上清液培养的LX-2细胞α-SMA、ColⅣ、CTGF和FN均为弥漫阳性,细胞染成深褐色;用HepG2培养的LX-2细胞呈局灶性棕黄色,DMEM培养的LX-2细胞染色阴性.ELISA检测LX 2(HepG2-HCV-C)组ColⅣ、HA、LN和PⅢNP的值均显著高于LX-2(HepG2)组和LX 2 (DMEM)组(均P＜0.05或P＜0.01). 结论 HCV C蛋白能上调TGF-β1的表达,表达C蛋白的细胞系能促进LX-2细胞多种细胞外基质(ECM)的合成.提示HCV C蛋白可能通过活化肝星状细胞,参与肝纤维化形成中多种ECM合成的调控.
丙型肝炎病毒、核心蛋白、HepG2细胞、LX-2细胞、活化
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R373.21(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
广东省科技计划项目2007B030702015
2013-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
869-873,877
