诺如病毒病毒样颗粒的表达及其与Caco-2细胞的结合活性研究

摘要：

目的 在杆状病毒表达系统转染的昆虫SF-9细胞中表达诺如病毒(Noroviruses,NoV)的衣壳蛋白VP1,并验证其与Caco-2细胞的结合活性. 方法 利用杆状病毒表达系统转染的昆虫SF-9细胞进行诺如病毒VP1蛋白表达,用蔗糖密度梯度超速离心方法纯化,采用Western blot鉴定表达产物,采用流式细胞术检测NoV病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)与Caco-2细胞的结合活性. 结果 重组质粒转染细胞表达产物经蔗糖密度梯度超速离心后进行SDS-PAGE,在分子质量单位55～70 ku之间有3条蛋白带,与预期重组蛋白NoV-VLPs大小相符;Western blot分析各蛋白组分均能被兔抗NoV多抗血清识别;流式细胞仪分析显示,加入重组蛋白NoV-VLPs后荧光信号较阴性对照组显著增强,表明表达的重组蛋白NoV-VLPs能够与Caco-2结合,且3个组分的结合能力不同(P＜0.05),以组分5与Caco2细胞结合的能力最强(P＜0.05). 结论 NoV-VLPs表达成功,并证明NoV-VLPs具有与Caco-2细胞结合活性,为NoV疫苗的开发和防治药物的研制奠定了基础.

关键词：诺如病毒、杆状病毒表达系统、病毒样颗粒、Caco-2细胞

所属期刊栏目：8

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：教育部留学回国人员科研启动基金资助项目及天津市卫生局科技基金资助项目2012KZ076

在线出版日期：2013-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：865-868