结核分枝杆菌Mtb8.4-Hspx和Hspx-Mtb8.4重组基因克隆及表达

摘要：

目的 构建结核分枝杆菌去标签重组蛋白Mtb8.4-Hspx(MH)和Hspx-Mtb8.4(HM)原核表达载体,并在大肠埃希菌株BL21(DE3)中表达.方法 以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,PCR扩增Mtb8.4、Hspx基因,产物经纯化后与载体PET30a连接、转化及测序鉴定,构建原核重组表达质粒PET30a-Mtb8.4和PET30a-Hspx.抽提重组质粒,产物经纯化后与目的 基因Hspx、Mtb8.4连接,转化及测序鉴定,构建重组目的 基因质粒PET30a-Mtb8.4-Hspx(PET30a-MH)和PET30a-Hspx-Mtb8.4(PET30a-HM)载体,转化大肠埃希菌BL21,以IPTG诱导,SDS-PAGE电泳检测表达产物.结果 SDS-PAGE蛋白电泳验证去标签MH和HM融合蛋白分子质量单位为28 ku,与预期值相符.结论 本研究成功表达去标签结核杆菌重组蛋白MH和HM,为结核亚单位疫苗免疫原性和临床前研究奠定了基础.

关键词：分枝杆菌、结核、Mtb8.4、Hspx、克隆、表达

所属期刊栏目：05

分类号：R378.911(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治"科技重大专项;兰州大学医学科研项目

在线出版日期：2010-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：414-417