蛔虫抗菌肽在毕赤酵母中的分泌表达及活性鉴定
目的 在毕赤酵母表达系统巾表达蛔虫抗菌肽cecropin P1并检测其生物活性.方法 根据毕赤酵母的密码子偏好性,人工设计并合成3条cecropin P1基因寡核苷酸片段.通过PCR扩增得到cecropin P1基因,构建重组载体pMD18-T-CecP1.双酶切pMD18-T-CecP1,将cecropin P1基因克隆到载体pPICZα-A信号序列α-因子之后,构建酵母分泌表达载体pPICZβ-A-CecP1,用Sac T将其线性化后转化毕赤酵母X-33,采用Zeocin抗性筛选阳性菌株并进行诱导表达,发酵上清进行SDS-PAGE分析,抑菌试验鉴定其抑菌活性.结果 获得酵母分泌表达载体pPICZa-A-CecP1.SDS-PAGE证实pPICZa-A-CecP1/X-33甲醇诱导产物的分子质量单位为6.3 ku.表达产物对大肠埃希菌DH5α的生长有抑制作用.结论 应用毕赤酵母表达系统能表达cecropin P1.该抗菌肽具有抑菌作用.
抗菌肽、毕赤酵母、蛔虫
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R383.11(医学寄生虫学)
2010-05-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
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