10.13929/j.1672-8475.201712016
腺病毒介导转铁蛋白受体报告基因在结直肠癌细胞MRI中的初步观察
目的 探讨腺病毒载体介导转铁蛋白受体报告基因(TFRC)转染人结直肠癌Lovo细胞的最佳感染复数(MOI)、目标基因表达情况及体外MR成像情况.方法 采用介导转铁蛋白受体报告基因的腺病毒(Ad-TFRC)载体以5、10、50、100的MOI转染Lovo细胞,以实时定量PCR检测相应mRNA表达.以浓度不一的转铁蛋白(Tf)-超微超顺磁性氧化铁(USPIO)探针转染细胞后,经普鲁士蓝染色确定最佳浓度,并以台盼蓝染色评价细胞活力.采用7.0T MR以T2、T2 map及T2*map序列对目标细胞成像,分析信号强度差异.结果 Ad-TFRC成功转染Lovo细胞,最佳MOI值为50,感染效率＞90％;实时定量PCR检测显示Ad-TFRC转染Lovo细胞中TFRC蛋白表达量较空白对照Lovo细胞增多(P＜0.01);普鲁士蓝染色结果示探针铁浓度为1.5 μg/ml时最佳,Lovo细胞内可见大量蓝染铁颗粒;探针标记的Lovo细胞及空白对照Lovo细胞盼蓝染色拒染率分别为(93.80±1.60)％和(95.10±2.30)％,差异无统计学意义(P＞0.05);体外MR T2W、T2 map及T2* map成像显示,与空白对照Lovo细胞比较,探针标记的Lovo细胞信号强度减弱(P＜0.05).结论 腺病毒载体可在Lovo细胞中高效表达转铁蛋白受体报告基因,磁化标记后可成功实现Lovo细胞的体外7.0T MR显像.
受体、转铁蛋白、磁共振成像、直肠肿瘤、报告基因
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R-332;R445.2(医学研究方法)
2015年国家自然科学基金81560293;宁夏医科大学2014年校级科研项目XM201459;宁夏医科大学2016年校级科研项目XM2016037;2013年宁夏自然科学基金NZ13159
2018-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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