四种不同血清型IBV的多重PCR鉴定方法的建立

摘要：

为了建立同时区分4种不同血清型IBV的多重PCR方法,试验针对IBV H120型、4/91型、QX型、LDT3型4种常用商用疫苗株的S1基因序列,分别设计特异性引物,并对退火温度、循环数和引物浓度等条件进行优化及特异性、敏感性、重复性等试验.结果表明:试验可特异性的扩增出 IBV LDT3型(860 bp)、H120型(679 bp)、4/91 型(499 bp)、QX 型(373 bp)毒株的目的条带.该检测方法仅对IBV的四种疫苗株检测为阳性,对NDV LaSota株、ALV JS09GY3株、ILTV Connecticut 株、MDV CVI988株、FAdV SCneijiang 株、IBV GI-19型、IBV GI-28型以及IBV GI-13型为阴性,对LDT3型、H120型、4/91型、QX型四种不同血清型的IBV重组质粒的检测下限分别为 1.13×105 copies/μL、7.56×104 copies/μL、4.61×106 copies/μL 和2.94×104copies/μL.相同条件下进行重复性试验可获得一致性的结果.应用建立的多重PCR方法对2019年市场上收集的20种不同厂家以及不同生产批号的IB疫苗产品进行检测,产品毒株种类标识与实际样品符合率为55％,而45％的IB疫苗毒株与实际标识不符,说明部分疫苗中存在其他IB疫苗株的污染.研究建立的多重PCR方法可应用于市场上不同IB疫苗毒株的鉴定以及临床疫苗样品毒株单一性检测,为IB疫苗的使用提供参考.

关键词：IBV、疫苗、多重PCR、检测方法

所属期刊栏目：43

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;现代农业产业技术体系建设专项;四川省重点研发计划项目

在线出版日期：2021-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：24-29