鸡内参基因β-actin和GAPDH实时定量PCR重组质粒标准品的构建

摘要：

本研究从SPF鸡皮肤中提取总RNA,并反转录为cDNA;以该cDNA为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)分别扩增出看家基因β-actin和GAPDH,将PCR产物连入pGEM-T easy载体,转化DH5α菌,经蓝白斑筛选和质粒酶切鉴定和DNA含量测定,得到定量的β-actin和GAPDH基因融合的重组质粒(pGEM T-actin和pGEM T-GAPDH),即实时定量PCR内参标准品.构建成功的标准品经10倍梯度稀释,作为模板,获得扩增效率良好及可信度高的标准曲线.构建成功的标准品可大量制备,可用于鸡的靶基因定量PCR所需的内参标准品.

关键词：内参基因、实时定量PCR、标准品、标准曲线

所属期刊栏目：33

分类号：R318;S858.28;R764.04

资助基金：国家自然科学基金;国家高技术研究发展计划（863计划）;基础研究项目

在线出版日期：2011-09-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：21-24