miR-155调节脓毒症诱导的炎症反应及肠道功能障碍的机制

摘要：

目的 探讨miR-155 在脓毒症中的临床价值,以及其在脓毒症引起的炎症反应和肠道功能障碍中的作用.方法 采用前瞻性观察性研究方法,收集 2021 年 11 月至 2023 年 4 月新疆医科大学第一附属医院129 例脓毒症患者及129 例同期健康体检者外周血样本,绘制受试者工作特征(ROC)曲线并计算曲线下面积(AUC),评价miR-155 在脓毒症中的诊断价值.所有脓毒症患者进一步根据病情严重程度分为脓毒症组(n =83)和脓毒性休克组(n =46).根据欧洲危重症医学会(ESICM)提出的诊断标准,进一步将脓毒症患者分为急性胃肠损伤(AGI)组(n =75)和非AGI组(n =54),比较两组循环miR-155 及外周血清二胺氧化酶(DAO)的表达水平.采用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立脓毒症大鼠模型,并按照随机数字法将32 只大鼠分为假手术(Sham)组、CLP组、miR-155 阴性对照组(CLP大鼠术前 1 个月腹腔注射 250 μL miR-155 腺相关病毒空载体)和miR-155 腺相关病毒抑制组(CLP大鼠术前1 个月腹腔注射250 μL miR-155 腺相关敲低病毒),每组 8 只.于造模后 24h经腹主动脉采血并取大鼠小肠组织,采用苏木素-伊红(HE)染色观察小肠病理学改变并进行肠黏膜损伤评分(Chiu's评分);采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-155 表达水平;采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清DAO、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平;采用免疫组化法及蛋白质免疫印迹法检测肠道紧密连接蛋白[紧密连接蛋白-封闭蛋白1(Claudin-1)及闭合蛋白(Occludin)]的表达.结果 脓毒症患者外周血miR-155 表达量较健康体检者明显升高,且脓毒性休克患者外周血miR-155 表达量亦高于脓毒症患者(P<0.05).经ROC曲线分析,外周血miR-155 表达量可区分脓毒症患者与健康体检者(AUC为0.932,敏感度为91.9%,特异度为 90.5%),也可区分脓毒症与脓毒性休克患者(AUC为0.883,敏感度为79.2%,特异度为80.6%),也可区分脓毒症AGI和非AGI患者(AUC为0.933,敏感度为80.4%,特异度为93.4%).此外,脓毒症组外周血miR-155 表达量与C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、乳酸、急性生理学与慢性健康状况评价Ⅱ(APACHEⅡ)评分、序贯器官衰竭评分(SOFA)、DAO、IL-6 及TNF-α呈正相关(均P<0.05).动物实验结果提示,与Sham组相比,CLP组大鼠小肠黏膜水肿、炎症细胞浸润,绒毛破坏塌陷、排列紊乱、部分腺体结构不完整,Chiu's评分明显升高,血清TNF-α、IL-6、DAO水平明显升高,小肠黏膜组织紧密连接蛋白表达减少.与CLP组相比,miR-155 抑制组大鼠肠道损伤得到明显缓解,表现为Chiu's评分、IL-6、TNF-α、DAO水平下降,紧密连接蛋白表达增加.结论 miR-155 可能是诊断脓毒症的潜在生物标志物,降低其表达水平可减轻脓毒症诱导的炎症反应和肠道功能障碍.

关键词：脓毒症、肠道屏障功能障碍、miR-155、炎症反应、急性胃肠损伤、紧密连接蛋白-封闭蛋白1、闭合蛋白、二胺氧化酶

所属期刊栏目：44

分类号：R631;R735.35;R574.2

资助基金：国家自然科学基金82160360

在线出版日期：2024-01-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：49-56