异甘草酸镁上调血红素氧合酶-1对巨噬细胞过度分泌炎症因子的作用研究

摘要：

目的 探讨异甘草酸镁(MgIG)在脂多糖(LPS)刺激的RAW264.7巨噬细胞中是否能通过上调血红素氧合酶-1(HO-1)起到抑制高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和一氧化氮(NO)释放的作用.方法 用LPS刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7制作炎症细胞模型.①先用不同浓度的MgIG与LPS合并处理24h,分别为Control组、LPS组和LPS+ MgIG不同剂量组(0.01 mg/mL、0.10 mg/mL、0.50 mg/mL和1.00 mg/mL);②再将培养细胞随机分为不同处理组(每组n=5):Control组、LPS组、LPS+ MgIG(1.00 mg/mL)和LPS+MgIG(1.00 mg/mL)+血红素氧化酶抑制剂[ZnPPIX(10 μmol/L)]组.用ELISA方法测定上清HMGB1浓度,用Griess法测定上清液NO的浓度水平,用Western bolt检测细胞内HO-1和iNOS蛋白的表达.结果 ①与Control组比较,LPS能够明显增加上清液HMGB1和NO浓度(均P＜0.05),并且在一定程度上增加细胞内HO-1的蛋白表达水平(P＜0.05);与LPS组比较,LPS+ MgIG不同剂量组均减少了HMGB1和NO的释放(均P＜0.05),并且随着剂量的增加,HMGB1和NO的上清液水平降低越明显,而HO-1的表达水平在LSP+ MgIG(0.10 mg/mL、0.50 mg/mL和1.00 mg/mL)组均明显诱导增加(均P＜0.05).②与Control比较,LPS同样明显增加上清液HMGB1和NO浓度(均P＜0.05),以及明显增加细胞内HO-1和可诱导一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达水平(均P＜0.05);与LPS组比较,LPS+ MgIG(1.00 mg/mL)组上清液中HMGB1和NO浓度明显下降(均P＜0.05),细胞内HO-1的蛋白水平明显增加(P＜0.05),细胞内iNOS的蛋白水平则明显下降(P＜0.05),而LPS+MgIG(1.00 mg/mL)+ZnPPIX(10 μmol/L)组上清液HMGB1和NO浓度、细胞内HO-1和iNOS的蛋白水平差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 MgIG能抑制LPS刺激巨噬细胞过度释放HMGB1和NO,能明显抑制LPS诱导的iNOS表达,并且依赖于HO-1的上调.

关键词：异甘草酸镁(MgIG)、血红素氧合酶-1(HO-1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、一氧化氮(NO)、脓毒症

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分类号：R28;R5

资助基金：黑龙江省自然科学基金ZJY0704-02;国家自然科学基金81171785;哈尔滨医科大学研究生创新科研项目YJSCX2015-21HYD

在线出版日期：2017-12-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：983-987