多器官功能障碍综合征患者血清对内皮细胞氧化损伤的影响及还原型谷胱甘肽的保护作用

摘要：

目的 探讨多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)患者血清对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)氧化损伤的影响及外源性还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的保护作用.方法 选择MODS患者20例,用其血清对HUVEC进行干预,建立体外细胞损伤模型,同时以健康血清组和胎牛血清组作对照,将细胞分为正常对照组(A组)、健康血清组(B组)、MODS血清损伤组(MODS患者血清浓度分别为C1组5％、C2组10％、C3组20％)和GSH干预组(10％ MODS患者血清细胞培养基中GSH终浓度分别为D1组0.064 mmol/L、D2组0.32 mmol/L、D3组1.6 mmol/L、D4组8.0 mmol/L、D5组40mmol/L).采用MTT法检测各组细胞生存率;荧光倒置显微镜下观察B组和C2组HUVEC形态学变化;分别检测B组、C2组和D3组药物干预24、48、72 h后细胞上清液超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和总抗氧化能力(T-AOC)水平,同时用流式细胞仪检测细胞内活性氧簇(ROS)水平.结果 ①B组细胞生存率与A组比较差异无统计学意义(P＞0.05),C1、C2、C3组细胞生存率较B组明显下降(P＜0.05),D2、D3、D4组细胞生存率较C2组明显升高(P＜0.05);②C2组HUVEC显微镜下可见损伤性改变,细胞变大变圆、界限模糊、胞体碎裂、部分细胞脱落;③C2组细胞培养上清液SOD、CAT、GSH-Px活力及T-AOC水平较B组下降,而D3组各时间点较C2组均明显升高,其中以药物干预72 h后升高更明显;④C2组细胞内ROS水平较B组明显升高,D3组各时间点ROS水平较C2组明显降低,其中以药物干预72 h后下降最明显.结论 MODS患者血清可造成内皮细胞损伤,GSH可通过提高SOD 、CAT、GSH-Px活力及T-AOC水平,降低细胞内ROS水平,从而发挥内皮细胞保护作用,减轻血管内皮细胞的氧化损伤.

关键词：多器官功能障碍综合征(MODS)、氧化应激、还原型谷胱甘肽(GSH)、人脐静脉内皮细胞(HUVEC)

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资助基金：兰州大学中央高校基本科研业务费专项资金lzujbky-2012-200

在线出版日期：2015-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：38-43