高迁移率族蛋白B1的表达纯化及其对单核细胞释放炎症因子的影响

摘要：

目的 通过重组HMGB1蛋白,观察其对单核细胞株THP-1释放炎症因子的影响.方法 用RT-PCR方法扩增人HMGB1 cDNA,将目的 片段HMGB1亚克隆到原核表达载体pGEX4T-1并转化大肠杆菌BL21,以IPTG诱导HMGB1融合蛋白表达,经Ni2+-NTA和多黏菌素B亲和层析柱纯化蛋白.分别用不同浓度的重组HMGB1蛋白(10、50和100 ng/mL)刺激THP-1细胞24 h,应用Liquichip液相蛋白芯片系统检测培养上清中TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8的浓度;以终浓度为100 ng/mL的HMGB1蛋白分别刺激THP-1细胞1、3、6、12和24 h,检测上述细胞因子的浓度.结果成功表达、纯化了重组HMGB1蛋白,与对照组相比,浓度为10、50和100 ng/mL的HMGB1蛋白均使TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8的分泌增加(P均<0.05),并且随着HMGB1蛋白剂量的增加呈递增趋势;上述细胞因子水平在以100 ng/mL的HMGB1刺激后3 h或6 h即开始升高(P均<0.05),并且均随刺激时间的延长而呈递增趋势.结论 HMGB1可诱导一系列细胞因子的产生和释放,为临床防治脓毒症提供了一个新的靶点.

关键词：高迁移率族蛋白B1、单核细胞、脓毒症、炎症因子

所属期刊栏目：29

分类号：R349.64(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：广州市医药卫生科技一般引导项目2008-YB-012,2009-YB-021;重点项目2008-ZDi-14;广东省医学科研基金项目A2009497

在线出版日期：2009-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：711-714