miR-149-5p靶向CDK6对口腔鳞状细胞癌细胞生长、侵袭和迁移的影响
目的 探讨miR-149-5p靶向CDK6对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞生长、侵袭和迁移的影响.方法 利用Lipo-fectamine2000将miR-149-5p mimic质粒、mimic-NC质粒、CDK6质粒分别或联合转染进入Tca8113细胞,运用基因预测软件预测miR-149-5p的靶基因,采用双荧光素酶实验验证靶向关系,RT-PCR检测miR-149-5p与CDK6 mRNA的表达,MTT法检测细胞活性,克隆形成实验检测细胞生长情况,流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡情况,Transwell法检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot检测CDK6、C-Myc、和Cyclin D1的表达,裸鼠右后肢腹侧皮下注射构建OSCC移植瘤模型,并测定移植瘤体积和重量,同时采用免疫组化检测Ki67和Vimentin的表达.结果 miR-149-5p在OSCC细胞中低表达,与CDK6在3'UTR区存在结合位点,miR-149-5p直接靶向抑制CDK6;miR-149-5p过表达能够明显降低Tca8113细胞活性和克隆数目,并增强G0/G1期细胞周期阻滞,增加凋亡率,减少侵袭数目,降低伤口愈合率,且下调C-Myc、CDK6、Cyclin D1蛋白表达,而加入CDK6后能够反转这些现象;miR-149-5p过表达会使体内移植瘤的重量和体积明显减少,并使移植瘤的Ki67和Vimentin的阳性细胞比率明显减少.结论 miR-149-5p靶向CDK6对口腔鳞状细胞癌细胞生长、侵袭和迁移具有抑制作用.
miR-149-5p、CDK6、口腔鳞状细胞癌、生长、侵袭、迁移
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R739.8(肿瘤学)
四川省医学会科研课题185823
2019-12-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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