抗狂犬病病毒中和抗体快速荧光灶抑制试验方法的验证

摘要：

目的 对抗狂犬病病毒中和抗体(Rabies virus neutralizing antibody,RVNA)快速荧光灶抑制试验(Rapid fluorescent focus inhibition test,RFFIT)进行验证.方法 利用已检测RVNA效价的人狂犬病疫苗免疫后血清建立血清参考品.采用参考血清和狂犬病人免疫球蛋白标准品,评价RFFIT方法的准确性、重复性、稳定性、线性和检测范围.结果 共制备5批血清参考品(A、B、C、D和E),RVNA效价分别为57.39、16.54、8.76、1.38和0.08IU/mL.采用效价适中的参考血清C进行RFFIT方法的认证.参考血清样品C加标(4.5IU/mL、2.25U/mL和1.1251U/mL)后的回收率分别为91.70％、80.15％和74.96％.同一实验人员对相同样品检测6次的RVNA中和效价的变异系数(Coefficient of variation,CV)为7.61％;2名实验人员对相同样品各检测3次的RVNA中和效价的CV为3.88％.标准品效价值与RFFIT方法检测值的线性方程为y=0.952 4x-0.119 2(R2=0.999),最低检出效价为0.04IU/mL.不同病毒-抗体中和时间、细胞-抗体-病毒孵育时间、丙酮固定时间和荧光抗体染色时间测定的参考血清C中和效价的CV均＜30％.结论 本研究建立的RFFIT方法对人狂犬病疫苗免疫后血清检测具有很好的准确性、重复性、线性和稳定性,推荐在相关血清检测中应用.

关键词：狂犬病病毒、抗狂犬病病毒中和抗体、快速荧光灶抑制试验、回收率、变异系数

所属期刊栏目：28

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2022-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：559-562