紫外辐射诱导的细胞凋亡中PUMA与Bcl-2家族蛋白间调控的分子成像研究
紫外辐射诱导的细胞凋亡是一个包括DNA损伤、死亡受体启动、线粒体破裂等一系列反应的复杂过程.有研究报道,由紫外辐射引发的DNA损伤可以激活肿瘤抑制因子p53,从而触发细胞凋亡级联反应,其中一个重要的事件就是上调促凋亡蛋白(p53 up-regulated modulator of apoptosis,PUMA)的表达.但是,PUMA在紫外辐射诱导凋亡过程中的作用机制尚不清楚.利用荧光共振能量转移技术(Fluorescence resonance energy transfer,FRET),在人类肺腺癌细胞(ASTC-α-1)内实时研究了紫外辐射诱导凋亡过程中PUMA,Bax,Bcl-X1三者之间的相互作用关系,从而揭示PUMA的作用机制.用120 mJ/cm2的紫外辐射剂量诱导细胞凋亡,通过共转染荧光探针GFP-PUMA和YFP-Bcl-Xl或者CFP-Bcl-Xl和YFP-Bax,在激光共聚焦扫描显微镜下实时检测PUMA和Bcl-Xl或者Bcl-Xl和Bax之间的相互作用.结果显示,紫外辐射后GFP-PUMA与YFP-Bcl-Xl之间的FRET现象逐渐增强,说明PUMA与Bcl-Xl的作用越来越强;CFP-Bcl-Xl与YFP-Bax之间的FRET现象逐渐减弱,说明Bcl-Xl与Bax的作用越来越弱,此过程伴随有YFP-Bax在线粒体的明显定位.该实验结果暗示PUMA是竞争结合了BclXl,解除了Bcl-Xl对Bax的抑制作用,进而活化了Bax.
紫外辐射、上调促凋亡蛋白、Bax、Bcl-Xl、荧光共振能量转移技术
36
O436(光学)
国家自然科学基金30870676,30870658;"长江学者与创新团队计划"创新团队项目IRT0829;广东省自然科学基金7117865资助课题
2009-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
2609-2613
