llinc000522调控Wnt通路影响胃癌侵袭转移的机制研究

摘要：

目的 探讨llinc000522调控Wnt通路影响胃癌侵袭转移的机制.方法 选取胃癌细胞系中的SGC-7901细胞,通过长链非编码RNA(IncRNA)表达谱与逆转录定量聚合酶链锁反应(qRT-PCR)结合,筛选出与INC0005相关且在胃癌细胞中具有侵袭转移作用的微小RNA( miRNA);通过体外细胞转染实验,研究Ilinc00052和miRNA的表达变化;通过分子实验,研究Ilinc00052表达及其对Wnt／β-连环蛋白( β-catenin)表达的影响,探索linc00052 能否通过调控miRNA影响Wnt／β-catenin 信号通路,影响胃癌细胞的侵袭转移.结果 通过Transwell小室试验测得未转染质粒组,穿膜细胞数为(134.10 ±4.29)个,llinc000522过表达转染质粒组穿膜细胞数为(169.24 ±6.99)个,差异有统计学意义( t ＝8.956, P ＝0.001 ).划痕实验显示, llinc000522过表达转染质粒组迁移距离显著高于空载质粒转染组(r＝0.907,P＜0.01). llinc000522过表达转染质粒组克隆形成率与空载质粒组相比明显提高[(92.75 ±6.32)%比(73.34 ±9.14)%,t＝5.998,P＜0.05].与空白质粒转染相比,llinc000522过表达转染组Wnt1、Wnt3a、Wnt2、β-catenin的miRNA表达均显著上调(均P＜0.05),而miRNA转染组对其表达并无明显作用,而当llinc000522、miRNA过表达共转染胃癌细胞后,Wnt1、Wnt3a、Wnt2、β-catenin miRNA 转录水平提高[(1.82 ±0.11)、(1.52 ±0.15)、( 1.42 ±0.21)、(1.71 ±0.19),P＜0.05],但其表达仍低于单独llinc000522转染的基因miRNA转录水平.与空白质粒转染相比,llinc000522过表达转染组Wnt1、Wnt3a、Wnt2、β-catenin蛋白表达均显著上调(均P＜0.05),而miRNA转染组对其表达并无明显作用,而当llinc000522、 miRNA 过表达共转染胃癌细胞后,Wnt1、Wnt3a、 Wnt2、β-catenin蛋白表达也明显提高[(1.53 ±0.09)、(1.4 ±0.21)、(1.33 ±0.07)、(1.47 ±0.19),P＜0.05],但其表达仍低于单独llinc000522转染的基因蛋白表达水平.结论 在胃癌细胞中,llinc000522可通过调控miR-NA水平,影响Wnt／β-catenin通路,进而影响胃癌的侵袭转移.

关键词：胃肿瘤、肿瘤侵润、肿瘤转移、WNT蛋白质类、长链非编码RNA、质粒、转染、克隆细胞

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资助基金：浙江省杭州市卫生计生科技计划一般项目;General Project of Health and Family Science and Technology Planning of Hangzhou City ,Zhe-jiang Province

在线出版日期：2020-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：174-178