应用4℃冰箱分离B型流感病毒

摘要：

目的：探索低温保存狗肾细胞（MDCK）对 B 型流感病毒分离和增殖的影响。方法复苏冻存的 P17代 MDCK 细胞，传至2～4代后，选择生长状态及形态良好的单层细胞，换新鲜细胞生长液，于4℃保存3 d、6 d、9 d 后，在相同培养条件下同时接种流感样病例咽拭子标本。上毒24 h 后每天观察细胞病变，采用实时荧光 PCR 相对定量法测定病毒的增殖率，血清学试验测定病毒血凝效价，同时以同一代次常规培养的 MD-CK 细胞单层为对照。结果（1）细胞病变：与对照相比较，4℃低温保存3、6 d 的细胞细胞病变无差别，而保存9 d 的细胞细胞病变快，维持时间短。（2）荧光定量：4℃低温保存3、6 d 的细胞对流感病毒的增殖（25．86×105～30．25×106、26．31×105～30．54×106）与常规分离（24．82×105～29．86×106）相比无差别，其增值率在105～106倍之间。而9 d 的细胞（19．72×104～28．34×105）则较对照要低，增值率在104～105倍之间。（3）HA 效价：4℃保存3 d 和6 d 的细胞分离病毒血凝效价大于116的毒株数与常规细胞（10．92±0.79）比较，差异无统计学意义（P ＞0．05），而保存9 d 的细胞分离病毒血凝效价大于116的毒株数较正常细胞低并有统计学意义（P ＜0．01）。结论4℃低温保存1周内 MDCK 细胞单层对 B 型流感病毒的分离和增值无影响。

关键词：MDCK细胞、B型流感病毒、分离、增殖

资助基金：贵州省疾病预防控制中心基金2013-E2-3

在线出版日期：2015-06-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1623-1625,1626