响应面法优化紫贻贝免疫活性肽的制备工艺

摘要：

目的 探讨紫贻贝免疫活性肽的酶解制备工艺.方法 本研究以紫贻贝(Mytilus edulis)为原料,选用5种不同的蛋白酶对其进行酶解,以小鼠RAW264.7巨噬细胞的相对增殖率和酶解液中活性肽的浓度为指标,在单因素实验基础上通过响应面法优化制备紫贻贝免疫活性肽(Mytilus edulis immunomodulatory peptides,MIP),同时采用CCK-8和中性红吞噬实验对其免疫活性进行初步研究.结果 实验数据表明,胰蛋白酶为最适蛋白酶,最佳酶解条件为:酶解温度43.7 ℃,pH 8.9,时间3.2 h,加酶量3000 U/g.在此条件下,100 μg/mL MIP对RAW264.7巨噬细胞的相对增殖率为92.4％.CCK-8结果显示,MIP对RAW264.7细胞无毒性作用且能显著促进细胞增殖.当MIP浓度为100 μg/mL时,中性红吞噬指数可提高至1.22.同时,形态学观察结果显示MIP可以刺激细胞分化形成伪足,细胞形态以不规则多边形为主.结论 MIP对RAW264.7细胞具有较好的免疫调节活性.

关键词：紫贻贝、免疫活性肽、响应面法、RAW264.7巨噬细胞

所属期刊栏目：40

分类号：S985.3+1(水产物运输、保鲜、贮藏、加工、包装)

资助基金：中国水产科学研究院基本科研业务费项目;中国水产科学研究院基本科研业务费项目;国家自然科学基金

在线出版日期：2022-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：21-29