基于荧光共振能量转移技术的STAT3二聚化抑制剂筛选模型的建立

摘要：

目的 构建信号传导与转录激活因子3 (signal transducer and activator of transcription factor 3,STAT3)二聚化抑制剂筛选模型,为STAT3抑制剂筛选提供实验方法.方法 分别构建pECFP-N1-STAT3和pEYFP-N1-STAT3的荧光报告栽体,利用脂质体转染技术将二者共转入HEK-293T细胞,利用ECFP和EYFP2种荧光蛋白之间能量共振转移,检测磷酸化STAT3分子的二聚化水平,并检测Stattic对二聚化的影响.结果 成功构建了pECFP-N1-STAT3和pEYFP-N1-STAT3的荧光报告载体.将2种荧光报告载体共转染HEK-293T细胞后,Western Blot检测结果显示STAT3以及p-STAT3的表达水平明显增加.以458 nm波长激发ECFP,其发射波长可激发EYFP.加入STAT3二聚化抑制剂Stattic后,荧光强度降低,且呈现一定的剂量依赖性.结论 基于荧光共振能量转移技术的STAT3二聚化抑制剂筛选模型构建成功.

关键词：信号传导与转录激活因子3(STAT3)、二聚化、荧光共振能量转移(FRET)、Stattic

所属期刊栏目：37

分类号：R965(药理学)

资助基金：青岛海洋科学与技术国家实验室鳌山科技创新计划项目2015ASKJ02

在线出版日期：2018-09-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：9-17