南海红树林来源链霉菌Streptomyces sp.OUC6819遗传操作系统的建立

摘要：

目的 建立南海红树林来源链霉菌Streptomyces sp.OUC6819菌株的遗传转化系统,通过基因阻断方法来研究次级代谢产物的生物合成途径.方法 分别以整合型载体pSET 152和用于同源重组的、包含可能参与大环多烯类化合物生物合成的DNA片段的非复制型cosmid质粒,通过大肠杆菌—链霉菌属间接合转移导入Streptomyces sp.OUC6819之中.结果 通过在接合转移过程中对菌丝体进行超声破碎,成功获得了正确的接合子.采用PCR方法验证了pSET152的导入和目标基因orf1的阻断,进一步对突变株的发酵产物进行了HPLC分析,结果显示突变株丧失了合成大环多烯类化合物的能力.结论 成功建立了基于菌丝体超声破碎的海洋链霉菌遗传转化系统,为对其它基因进行遗传学操作奠定了基础,也为其它不便进行遗传操作的链霉菌提供了参考.

关键词：Streptomyces sp.OUC6819、PKSs、PCR-targeting、接合转移、基因敲除

所属期刊栏目：35

分类号：R915(药物基础科学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2016-09-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：53-59