姜黄素mPEG-PLGA纳米粒对香烟提取物刺激巨噬细胞RAW264.7所致激素抵抗现象逆转作用的研究
目的 制备以单甲氧基聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸共聚物(mPEG-PLGA)为载体的姜黄素纳米粒(CUR-NPs),探讨姜黄素(CUR)和CUR-NPs逆转香烟提取物(CSE)暴露所致的激素抵抗现象,比较C-UR-NPs和CUR生物学作用的差异.方法 采用乳化溶剂挥发法制备CUR-NPs,激光粒度测定仪和透射电子显微镜分别对CUR-NPs的粒径分布和形貌进行表征.脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞RAW264.7,布地奈德(BUD)(10-10 ～ 10-5 mol/L)干预.LPS+ CSE刺激巨噬细胞RAW264.7,BUD(10-10～10-5 mol/L)、CUR(10-10 ～ 10-5 mol/L)、CUR(10-7 mol/L)+ BUD(10-9～10-5 mol/L)、CUR(10-9～10-5 mol/L)+ BUD(10-7 mol/L)、CUR-NPs(10-9～10-5 mol/L)+BUD(10-7 mol/L)干预,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测巨噬细胞RAW264.7所分泌的IL-8.CES刺激巨噬细胞RAW264.7,BUD(10-7 mol/L)、CUR(10-7、10-6 mol/L)和CUR-NPs(10-7、10-6 mol/L)干预,实时定量PCR检测细胞中组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2) mRNA的表达,蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞中HDAC2蛋白的表达.共聚焦显微镜检测巨噬细胞RAW264.7对CUR和CUR-NPs内CUR的摄取量.结果 CUR-NPs外观呈圆形或类圆形,平均粒径为(356.4±146.6)nm.与LPS刺激相比,LPS+ CSE共刺激时BUD(10-10～10-5 mol/L)对IL-8分泌的最大抑制率显著降低(P＜0.05),半数抑制浓度(IC50)显著增高(P＜0.05).LPS+ CSE共刺激时,与BUD(10-10～ 10-5 mol/L)组相比,CUR(10-7 mol/L)+ BUD(10-9-10-5mol/L)组BUD对IL-8分泌的最大抑制率显著增高(P＜0.05),IC50显著降低(P＜0.05).在LPS+ CSE共刺激,CUR和CUR-NPs浓度梯度同为10-9、10-8和10-7 mol/L时,CUR-NPs+BUD(10-7 mol/L)组对IL-8分泌的抑制率显著高于CUR+ BUD(10-7 mol/L)组(P＜0.05).CSE刺激后细胞中HDAC2的mRNA和蛋白表达量显著降低(P＜0.05);与CSE组相比,CUR(10-7、10-6 mol/L)组及CUR-NPs(10-7、10-6 mol/L)组细胞中HDAC2的mRNA和蛋白表达量显著增高(P＜0.05).浓度梯度同为10-7 mol/L时,CUR-NPs组细胞中HDAC2的mRNA和蛋白表达量高于CUR组(P＜0.05).浓度梯度同为10-7 mol/L时,巨噬细胞RAW264.7对CUR-NPs内CUR的摄取量显著高于CUR(P ＜0.05).结论 CUR及CUR-NPs能够逆转CSE暴露所致的激素抵抗,CUR-NPs能够提高细胞对CUR的摄取量,在低浓度梯度情况下,CUR-NPs具有更强的逆转激素抵抗的作用.
姜黄素、激素抵抗、纳米粒子、共聚物
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上海市科委科技创新行动计划重点项目编号:14401970500
2016-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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