泛素对人脐静脉内皮细胞和巨噬细胞的影响

摘要：

目的 对比分析泛素对正常状态下的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)和巨噬细胞的影响及其差别,并评价泛素是否对脂多糖(LPS)诱导的HUVECs损伤具有保护作用.方法 在显微镜下观察不同浓度泛素干预后HUVECs细胞形态学的变化.将体外培养的HUVECs和人巨噬细胞分为空白对照组和4个泛素干预组(0.01 μg/mL组、0.1μg/mL组、1tμg/mL组和10 μg/mL组),ELISA法测定干预后24 h各组细胞上清肿瘤坏死因子o(TNF-α)和血管细胞粘附分子1(VCAM-1)水平,Western blot法测定细胞核因子κB(NF-κB)蛋白水平.用0.1μg/mL泛素干预10 μg/mL LPS诱导的HUVECs,ELISA法测定8、16和24 h泛素+LPS组和LPS组细胞上清TNF-α和VCAM-1水平.结果 随着泛素干预浓度的增加,HUVECs损伤的程度逐步加重,当泛素浓度达到50 μg/mL时,细胞开始呈气球样变并大量死亡.随着泛素干预浓度的升高,HUVECs细胞上清TNF-α和VCAM-1水平呈先升高后降低的变化趋势,而人巨噬细胞的TNF-α和VCAM-1水平则是呈逐步升高的趋势;HUVECs和人巨噬细胞NF-κB蛋白水平在泛素浓度为0.1μg/mL和1μg/mL时明显增高,而在0.01 μg/mL和10 μg/mL时增高不明显,甚至有减低的趋势,其中HUVECs减低的趋势更为明显.0.1μg/mL泛素干预10μg,/mL LPS诱导的HUVECs,各时间点LPS组和泛素+LPS组的TNF-α和VCAM-1水平相似,差异无统计学意义.结论 较低浓度的泛素对HUVECs即有明显的损伤作用,而人巨噬细胞则需要较高的泛素浓度才出现损伤.泛素对体外培养的LPS诱导的HUVECs损伤不具有明显的保护作用.

关键词：泛素、人脐静脉内皮细胞、人巨噬细胞、脂多糖

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分类号：R329.24;R772.2;R587.1

资助基金：南京医科大学科技发展基金面上项目2011NJMU076

在线出版日期：2015-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：173-177