不同体积浓度胎牛血清对大鼠髓核间充质干细胞生物学特性的影响
目的：研究大鼠髓核间充质干细胞（NPMSCs）体外培养的最佳血清体积浓度并探讨椎间盘退变的机制。方法用胶原酶、胰酶序贯消化法从SD大鼠腰部和尾部的椎间盘组织中提取NPMSCs，并进行体外培养，将其传代。①利用流式细胞仪对第3代传代NPMSCs细胞表型CD29、CD34、CD24、CD90、CD105进行鉴定；②利用普通PCR鉴定体外培养的NPMSCs细胞基因Sox2、Nanog的表达；③在37℃、21%O2、5%CO2的细胞培养箱中用成骨、成软骨、成脂培养液诱导培养第3代传代NPMSCs，2周以后，用染色剂对其染色，观察其成脂、成骨、成软骨能力。④在37℃、21%O2、5%CO2的细胞培养箱中用不同血清体积浓度（0%、5%、10%、20%、30%）的 DMEM-F12血清培养液培养第3代传代 NPMSCs，72h 后利用CCK-8法检测细胞的增殖，并采用RT-PCR检测细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原、SOX9的mRNA表达，借助流式细胞仪对细胞进行细胞凋亡的检测。结果①大鼠NPMSCs的成骨、成软骨能力强，成脂能力较差，且其细胞表面高度表达CD29、CD90、CD105，低度表达CD24、CD34，细胞基因 Sox2、Nanog 高度表达。②随着培养液血清体积浓度增加， OD 值增大， NPM-SCs的凋亡率降低，细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原、SOX9基因的mRNA表达增加。结论①大鼠NPMSCs具有间充质干细胞特性；②细胞外营养影响大鼠NPMSCs的增殖、分泌、凋亡。
椎间盘退变、髓核间充质干细胞、营养、增殖、凋亡
R68;TH7
2014-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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