突变型DNA聚合酶β碱基切除修复活性的分析

摘要：

目的 分析162位Val→Als突变型DNA聚合酶β(DNA polymerase β,polβ)碱基切除修复活性的变化,为探讨修复基因DNA聚合酶β突变在肿瘤发生发展中的作用积累实验依据.方法 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)分别诱导含有野生型和162位Val→Ala突变型DNA聚合酶β表达载体(pQE80L-Wpolβ和pQE80L-Mpolβ)的大肠杆菌DH5α;通过镍柱亲和层析法纯化蛋白,复性后蛋白定最;退火合成含有单碱基缺失的DNA底物,与纯化的野生型和突变型DNA聚合酶β蛋白进行BER修复试验.结果 通过诱导、纯化得到38kd野生型和突变型DNA聚合酶β蛋白;在BER实验中,野生型DNA聚合酶β能够在DNA底物的酶切位点处将其完全切开,而突变型DNA聚合酶β仅部分将其切开.结论 162位Val→Ala突变型DNA聚合酶β碱基切除修复能力显著减弱,提示肿瘤发生发展与polβ基因修复活性降低密切相关.

关键词：DNA聚合酶β、突变、切除修复

所属期刊栏目：11

分类号：Q78;Q50

在线出版日期：2009-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：43-46