仙茅苷调节lncRNA MEG3/miR-181a-5p通路对骨质疏松大鼠成骨细胞自噬的影响

摘要：

目的 探讨仙茅苷(Curculigoside,CUR)对骨质疏松症(osteoporosis,OP)大鼠成骨细胞自噬的影响以及对 lncRNA MEG3/miR-181a-5p信号轴的调节作用.方法 体外培养骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)诱导成骨细胞分化,CCK-8 法筛选CUR浓度;数据库预测lncRNA MEG3 与miR-181a-5p结合位点;利用转染技术将BM-MSCs细胞分为NC组、CUR组、CUR+3-MA组、CUR+pc-NC 组和 CUR+pc-LncRNA MEG3 组,qRT-PCR 检测 lncRNA MEG3、miR-181a-5p 的表达水平,碱性磷酸酶(ALP)染色法检测细胞ALP活性,MDC法检测细胞自噬体数量,免疫荧光检测细胞微管相关蛋白 1-轻链 3(LC3)、自噬效应蛋白(Beclin1)的表达.肌肉注射地塞米松磷酸钠建立OP大鼠,大鼠分为对照组(CT组)、模型组(OP组)、OP+CUR组(灌胃15 mg/kg CUR),CT检测大鼠胫骨骨形态学,Western blot和qRT-PCR分别检测LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1 与lncRNA MEG3、miR-181a-5的表达.结果 25 μg/mL以上浓度的CUR显著提高BM-MSCs细胞增殖活力(P＜0.05);lncRNA MEG3 与miR-181a-5p具有靶向结合位点;与NC组相比,CUR组细胞ALP 活性、自噬体数量以及LC3、Beclin1 表达增加(P＜0.05);与CUR组相比,CUR+3-MA组细胞ALP 活性、自噬体数量以及LC3、Beclin1 表达减少(P＜0.05);与CUR+pc-NC组相比,CUR+pc-LncRNA MEG3 组细胞ALP活性、自噬体数量以及LC3、Beclin1 表达减少(P＜0.05).OP组大鼠骨形态学评价以及LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、miR-181a-5p表达较CT组下降,lncRNA MEG3 表达增加(P＜0.05);OP+ CUR组大鼠骨形态学评价以及LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、miR-181a-5p表达较OP组增加,lncRNA MEG3 表达降低(P＜0.05).结论 CUR可能通过调节LncRNA MEG3/miR-181a-5p信号轴促进OP大鼠成骨细胞自噬活性.

关键词：长链非编码RNA MEG3、骨质疏松症、微小RNA-181a-5p、成骨细胞自噬

所属期刊栏目：29

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：河南省高等学校重点科研项目;国家中医临床研究基地业务建设科研专项;河南省中医药科学研究专项课题

在线出版日期：2023-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1409-1414,1465