从少火生气理论探讨肾气丸促巨噬细胞M2型极化影响成骨的作用

摘要：

目的 基于少火生气理论探讨肾气丸原组方(SQW)和肾气丸去除桂枝、附子(SQQ)诱导巨噬细胞M2 型极化对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)成骨分化作用的效果差异.方法 采用CCK8 法分别检测SQW、SQQ对RAW264.7 细胞存活率的影响,以确定药物干预的安全作用浓度.将RAW264.7 细胞分为CON组、IL-4组、IL-4+SQW组、IL-4+SQQ组.将不同药物组诱导巨噬细胞M2 型极化后分泌的细胞上清液作为条件培养基培养BMSC,评估BMSC成骨分化的能力.用碱性磷酸酶染色法(ALP)及茜素红染色法(ARS)检测各组BMSC成骨分化能力;使用免疫荧光技术(IF)检测BMSC成骨标志蛋白骨形态发生蛋白 4(BMP4)、骨保护素(OPG)的分布和表达;使用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测M2 型巨噬细胞极化相关的精氨酸酶 1(ARG1)、白细胞介素 10(IL-10)的表达以及BMSC成骨相关的BMP4、RUNT相关转录因子2(RUNX2)的表达.结果 与IL-4+SQQ组相比,IL-4+SQW组更加显著促进M2 型巨噬细胞极化相关因子ARG1、IL-10 上调(P＜0.01),且其条件培养基培养的BMSC的ALP及ARS染色增强,成骨蛋白BMP4、OPG、RUNX2 表达升高(P＜0.05).结论 肾气丸原组方与肾气丸去除桂枝、附子两味药相比,具备更强的促进巨噬细胞M2 型极化与增强BMSC成骨分化能力,为少火生气理论提供了实验依据.

关键词：少火生气、肾气丸、巨噬细胞M2型极化、成骨分化

所属期刊栏目：29

分类号：R274

资助基金：广东省自然科学基金;国家自然科学基金;广东省普通高校重点科研和平台

在线出版日期：2023-10-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1346-1353