连翘苷调节相关信号通路对地塞米松诱导的成骨细胞自噬和凋亡的影响

摘要：

目的 探讨连翘苷(phillyrin,PHN)调节磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸激酶(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导的成骨细胞自噬和凋亡的影响.方法 将MC3T3-E1细胞分为对照组(NOR组)、DEX组(10μmol/L DEX处理MC3T3-E1细胞)、L-PHN组(5μmol/L PHN处理MC3T3-E1细胞)、M-PHN组(10μmol/L PHN处理MC3T3-E1细胞)、H-PHN组(20μmol/L PHN处理MC3T3-E1细胞)、ZSTK474组(用20μmol/L PHN和2μmol/L的PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂ZSTK474处理MC3T3-E1细胞);MTT法检测细胞毒性和细胞活力;流式细胞术检测MC3T3-E1细胞凋亡;透射电子显微镜(TEM)观察自噬小体;Western blot法检测MC3T3-E1细胞中自噬、凋亡和PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白表达;ALP活性及ALP染色检测MC3T3-E1细胞分化能力.结果 0～80μmol/L PHN对MC3T3-E1细胞无明显毒性影响.与NOR组相比,DEX组OD570值、Bcl-2蛋白水平、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、mTOR蛋白水平、ALP活性、Beclin1、LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白水平以及自噬小体数目显著降低(P<0.05),凋亡率、Bax、cleaved-Caspase-3显著升高(P<0.05),与DEX组相比,L-PHN组、M-PHN组、H-PHN组凋亡水平显著降低(P<0.05),增殖活性、自噬水平、成骨分化能力、通路蛋白水平显著升高(P<0.05);而ZSTK474消除了PHN对MC3T3-E1细胞的有利作用.结论 PHN可能通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路促进成骨细胞自噬,进而抑制其凋亡.

关键词：连翘苷、PI3K/AKT/mTOR信号通路、地塞米松、成骨细胞、自噬、凋亡

所属期刊栏目：29

分类号：R-332;R965(医学研究方法)

资助基金：武汉市医学科研项目WZ21C09

在线出版日期：2023-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：976-981