填精益气中药对BMSCs成骨分化及甲基化转移酶METTL3的影响

摘要：

目的 探究基于"精气互化"理论的填精益气中药对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向成骨分化的影响以及其分化过程中对甲基化转移酶METTL3、WTAP、PPARγ 影响的实验研究.方法 将BMSCs随机分为对照组、诱导组、填精组、益气组以及填精益气组.填精组药物为鹿茸提取液,益气组药物为黄芪甲苷,填精益气组药物为鹿茸提取液联合黄芪甲苷.使用ELISA法检测6、12、18 d各组细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)含量变化;qRT-PCR法检测各组细胞METTL3、WTAP、PPARγ的基因转录;Western blot法检测各组METTL3、WTAP、PPARγ的蛋白表达.结果 ALP实验结果显示,填精益气组ALP活性优于填精组和益气组,且在第12天填精益气组的ALP活性达到了最高值;QRT-PCR及Western blot的实验结果表明,与对照组相比,各用药组甲基化转移酶METTL3和WTAP mRNA及蛋白表达水平均显著上调(P<0.01),PPARγmRNA及蛋白表达水平显著下调(P<0.01).结论 填精法、益气法、填精益气法对BMSCs向成骨分化均具有促进作用,可能是通过提高甲基化转移酶METTL3和WTAP表达,降低PPARγ的表达,进而促进BMSCs向成骨分化增加,向成脂分化减少而实现的.三组中填精益气组明显优于单独用药组,说明填精益气组更有效提高BMSCs增殖向成骨分化,延缓成骨细胞凋亡进程,对绝经后骨质疏松症及其并发症的防治具有指导意义.

关键词：骨髓间充质干细胞、填精益气、METTL3、甲基化、骨质疏松症

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分类号：R285.5;R-332(中药学)

资助基金：国家重点研发计划;辽宁省自然科学基金面上项目;辽宁省教育厅重点攻关项目;沈阳市中青年科技创新人才支持计划;辽宁中医药大学自然科学重点项目;辽宁中医药大学中医脏象理论;教育部重点实验室开放基金

在线出版日期：2023-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：937-941