MiR-2861/TIMP4轴在地塞米松-诱导小鼠骨质疏松症模型的分子机制研究

摘要：

目的 研究与地塞米松-诱导的骨质疏松症密切相关的靶microRNAs分子及其作用机制.方法 在体动物实验,将小鼠随机分为Control组和地塞米松-诱导的骨质疏松症小鼠(Model)组;microRNA表达谱测序分析上述两组小鼠股骨近端骨组织中microRNAs的显著变化;生物信息学分析miR-2861与TIMP4的序列互作位点;qPCR检测两组小鼠股骨组织中miR-2816和TIMP4的RNA表达情况.双荧光素酶报告基因检测确证miR-2861与TIMP4的序列互作.体外细胞实验,对细胞进行地塞米松(Dex)处理后,分别敲低miR-2861或TIMP4;Annexin V-PI双标记流式细胞术检测各种处理前后细胞凋亡情况,Western blot检测各种处理前后凋亡相关蛋白的表达情况.结果 microRNA表达谱测序结果显示,与Control组小鼠相比,Model组小鼠股骨近端骨组织中miR-2861显著上调.双荧光素酶报告基因检测确证miR-2861对TIMP4的负调控作用.qPCR检测确证与Control组小鼠相比,Model组小鼠股骨组织中miR-2816表达显著上调,TIMP4表达显著下调(P<0.05).体外细胞实验,与Control组相比,Dex处理组细胞凋亡显著上升(P<0.05),凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase-3、Bax/Bcl-2显著升高(P<0.05);与Dex+inhibitor NT组相比,Dex+miR-2861 inhibitor组细胞凋亡显著降低,凋亡相关蛋白表达显著下调,TIMP4表达显著升高(P<0.05);与Dex+TIMP4 siRNA NT组相比,Dex+TIMP4 siRNA组细胞凋亡显著升高,凋亡相关蛋白表达显著升高,TIMP4表达显著降低(P<0.05).结论 Dex通过miR-2861/TIMP4轴促进地塞米松-诱导的骨质疏松症小鼠成骨细胞凋亡.

关键词：地塞米松、骨质疏松症、成骨细胞、miR-2816、TIMP4

所属期刊栏目：29

分类号：R318(医用一般科学)

资助基金：海南省卫生健康行业科研项目21A200293

在线出版日期：2023-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：336-342,360