健骨方对破骨细胞形成和成骨细胞增殖分化的影响

摘要：

目的 探讨健骨方水提物对破骨细胞分化及成骨细胞增殖分化的影响.方法 制备健骨方水提物,通过MTT法测定药物对骨髓单核巨噬细胞(BMMs)细胞的毒性,采用核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导BMMs分化形成破骨细胞,加入不同浓度药物进行干预,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)染色法测定破骨细胞分化抑制作用,采用Western Blot法测定RANKL诱导的NF-κB破骨细胞分化信号通路,运用RT-qPCR法测定信号通路下游破骨细胞分化关键基因NFATc1、C-FOS等的mRNA表达水平.以MC3T3-E1细胞作为前体成骨细胞,加入不同浓度药物进行干预,通过CCK8法测定细胞增殖能力、PNPP法检测碱性磷酸酶(ALP)活性、茜素红S染色法测定细胞矿化能力.结果 MTT法结果显示,健骨方细胞有毒性浓度大于500 μg/mL(P＜0.05),破骨细胞分化抑制IC50为1.25 μg/mL.机制研究显示健骨方显著下调了RANKL-NF-κB信号通路中的p-P65、P53的蛋白表达(P＜0.05),显著抑制了通路下游C-FOS、NFATc1等的mRNA表达水平(P＜0.01,P＜0.05).此外,成骨细胞活性检测显示,健骨方能明显促进MC3T3-E1细胞增殖、提高ALP活性及增加成骨细胞钙化的能力.结论 健骨方具有抑制破骨细胞分化和促进成骨前体细胞增殖、分化、矿化的药效作用.其作用与抑制破骨细胞分化RANKL-NF-κB信号

关键词：健骨方、破骨细胞、成骨细胞、骨质疏松症、中医药

所属期刊栏目：28

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;广东省省基础与应用基础研究基金;广东省中医药局科研项目

在线出版日期：2023-02-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1728-1734