鹰嘴豆芽异黄酮对小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1增殖及分化的研究

摘要：

目的 探讨鹰嘴豆芽异黄酮(isoflavones extracted from chickpea sprouts,ICS)对小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1增殖、分化的影响及机制.方法 采用CCK-8法检测不同浓度ICS(0、0.1、0.5、1、5、10、50、100 mg/L)对MC3T3-E1细胞在24、48、72 h的增殖作用.成骨诱导培养基中加入不同浓度ICS(0、0.5、1、5 mg/L)观察其对成骨分化不同指标的影响:诱导第7天进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatease,ALP)染色观察酶活性;第21天进行茜素红染色观察钙沉积;RT-qPCR检测诱导7 d各组Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)和1型胶原蛋白(collagen-1,COL1)mRNA表达水平;通过Western Blot检测诱导7 d RUNX2和COL1的表达水平,同时加入雌激素受体(estrogen receptor,ER)抑制剂ICI 182,780(1 μmol/L),检测对成骨分化相关蛋白RUNX2和COL1蛋白表达的影响.结果 ICS在0～10 mg/L浓度范围促进了细胞的增殖(P＜0.05),当浓度大于10 mg/L时对细胞有毒性作用(P＜0.05);与对照组(0 mg/L)比较,ICS浓度为0.5、1、5 mg/L均能促进ALP活性,具有显著差异,且具有剂量依赖性;诱导21 d后茜素红染色结果显示,ICS能够促进钙沉积,随剂量升高钙结节数量明显增多,具有统计学差异;ICS能够上调成骨分化相关基因RUNX2、OCN和COL1的mRNA转录水平(P＜0.05),促进成骨分化相关蛋白COL1、RUNX2的表达(P＜0.05);雌激素受体抑制剂ICI 182,780抑制ICS对成骨分化相关蛋白COL1、RUNX2的表达(P＜0.05).结论 ICS能够促进小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1的增殖,并通过上调成骨分化相关基因及蛋白的表达,诱导MC3T3-E1细胞的成骨分化,雌激素受体抑制剂ICI 182,780 能够抑制ICS的成骨诱导分化作用,推测ICS是通过ER相关通路实现促进成骨分化作用的.

关键词：鹰嘴豆芽异黄酮、MC3T3-E1细胞、成骨分化

所属期刊栏目：28

分类号：R681(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;新疆维吾尔自治区自然科学基金重点项目

在线出版日期：2023-02-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1723-1727,1734