胃饥饿素对衣霉素诱导成骨细胞内质网应激的影响

摘要：

目的 建立衣霉素诱导成骨细胞内质网应激的模型,探讨胃饥饿素( ghrelin)对衣霉素诱导成骨细胞内质网应激的影响.方法 选取小鼠成骨细胞MC3T3-E1 为研究对象,①分别将不同浓度的衣霉素(0、0. 5、1、1. 5 μg/mL)加入成骨细胞培养基中,分别孵育24 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖活性;二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯探针( DCFH-DA)检测胞内活性氧( ROS)的含量;real-time quantitative PCR(qRT-PCR)检测各组细胞内内质网应激相关标志性基因BIP、CHOP、caspase-12 mRNA的表达.最后选择衣霉素作用最敏感浓度1. 5μg/mL,建立成骨细胞内质网应激的模型.②观察ghrelin对成骨细胞内质网应激的影响.分别用不同浓度的ghrelin(0、10-11、10-9、10-7 mmol/L)预处理成骨细胞4 h后,加入1. 5μg/mL的衣霉素诱导成骨细胞内质网应激.培养结束后,利用上述方法检测细胞增殖活性、胞内ROS的含量、内质网应激相关标志性基因的表达.结果 与对照组相比,不同浓度的衣霉素干预成骨细胞24 h 后,细胞增殖和存活率呈浓度依赖性明显降低. 1. 0μg/mL 和1. 5μg/mL的衣霉素干预细胞24 h后细胞增殖和存活率的降低有统计学意义(P＜0. 05),而0. 5μg/mL的衣霉素干预后无统计学意义(P＞0. 05);与对照组相比,胞内ROS的含量随浓度的增加逐渐增加( P＜0. 05);qRT-PCR结果显示,与对照组相比,不同浓度衣霉素干预细胞后CHOP mRNA的表达均有明显的提高且均有统计学意义( P＜0. 05),而BIP、caspase-12 mRNA的表达只在1. 0μg/mL和1. 5μg/mL衣霉素干预后有统计学意义(P＜0. 05),0. 5μg/mL衣霉素干预后无统计学意义( P＞0. 05);②与单纯1. 5μg/mL衣霉素相比,用不同浓度的ghrelin预处理成骨细胞4 h后再加1. 5μg/mL衣霉素,发现细胞增殖和存活率随ghrelin浓度增高而增加,10-9、10-7mmol/L ghrelin预处理后有统计学意义(P＜0. 05),而10-11mmol/L ghrelin预处理后无统计学意义(P＞0. 05);与单纯1. 5μg/mL衣霉素相比,不同浓度的ghrelin预处理后胞内ROS的含量减少,且均有统计学意义( P＜0. 05);qRT-PCR结果显示,在10-9和10-7mmol/L ghrelin预处理后,CHOP mRNA表达降低有统计学意义(P＜0. 05),而10-11 mmol/L的ghrelin预处理后无统计学意义(P＞0. 05).对于BIP和caspase-12 mRNA的表达,不同浓度的ghrelin预处理后均有统计学意义(P＜0. 05).结论 衣霉素可以诱导成骨细胞内质网应激的发生,ghrelin在一定程度上可以抑制成骨细胞内质网应激.

关键词：成骨细胞、胃饥饿素、内质网应激、骨质疏松症

所属期刊栏目：25

分类号：R589.9(内分泌腺疾病及代谢病)

在线出版日期：2019-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：913-919