不同牵张应力对成骨细胞MC3T3-E1分化及Wnt信号转导通路的影响研究

摘要：

目的 研究不同强度和时间的机械牵张应力刺激对成骨细胞的分化及Wnt信号转导通路的影响.方法 采用FlexcellFX5000细胞加力系统,分别采用3％,6％,12％的形变幅度的正弦波对MC3T3细胞进行牵张应力干预,0.5 Hz的频率,时间分别为2,4,8h.干预结束后分别检测细胞的ALP活性;提取细胞总RNA后采用 Real time-PCR 分别检测骨钙蛋白(Osteocalcin,OC)、Runx2、Osterix、Wnt1、β-catenin、DKK-1 mRNA的表达;提取细胞总蛋白后采用Werstern blot法分别检测Wnt1、β-catenin 和Phosphor-33/37-β-catenin的蛋白表达量.结果 3％和6％强度牵张干预后,成骨细胞ALP活性升高,OC、Runx2、Osterix、Wnt1、β-catenin mRNA表达升高,而DKK-1 mRNA表达下降.6％的效应高于3％,且干预4h后升高幅度最大.12％强度牵张干预后,成骨细胞的ALP活性和OC mRNA表达水平下降.Wnt1、β-catenin和Phosphor-33/37-β-catenin蛋白表达水平与上述mRNA表达水平相符.结论 中小强度的牵张刺激可以上调Wnt信号转导通路,促进成骨细胞分化,而大强度及长时间连续干预则无成骨分化作用,甚至有抑制作用.

关键词：牵张应力、成骨细胞、细胞分化、Wnt信号转导通路

所属期刊栏目：22

分类号：R68(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：国家自然科学基金项目81170323;上海体育学院研究生教育创新计划yjscx2015007;上海市人类运动能力开发与保障重点实验室上海体育学院11DZ2261100

在线出版日期：2016-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：9-13