健骨颗粒含药血清对体外破骨细胞CAⅡ、CK、MMP-9mRNA表达的影响

摘要：

目的 通过观察补肾健脾中药健骨颗粒含药血清对体外破骨细胞CA Ⅱ、CK、MMP-9mRNA表达的影响,进一步揭示健骨颗粒有效防治绝经后骨质疏松症的作用机制.方法 用M-CSF和RANKL诱导破骨前体细胞RAW264.7分化为成熟破骨细胞,alamarBLue法检测破骨细胞血清干预的最佳浓度,于破骨细胞培养第7天开始干预,分别用25％浓度的健骨颗粒含药血清和25％浓度的生理盐水血清干预,培养48小时后抽提总RNA,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、实时荧光定量SYBRGREEN法检测CA Ⅱ、CK、MMP-9mRNA表达,并取骨片行甲苯胺蓝染色,计算分析骨陷窝数和骨吸收面积,同时运用氧化显色法检测破骨细胞培养液中TRAP含量,ELISA法检测骨磨片培养液中CTx含量.结果 健骨颗粒含药血清组破骨细胞CA Ⅱ、CK、MMP-9mRNA表达水平明显低于生理盐水血清组(P＜0.05),含药血清组骨磨片的骨陷窝数和骨吸收面积以及TRAP和CTx含量均低于生理盐水血清组(P＜0.05).结论 健骨颗粒能有效抑制破骨细胞CA Ⅱ、CK、MMP-9mRNA表达,降低破骨细胞功能活性,抑制破骨细胞对骨基质的分解,从而抑制骨吸收.

关键词：中药、健骨颗粒、骨质疏松、破骨细胞、骨吸收、Ⅱ型碳酸酐酶、组织蛋白酶K、基质金属蛋白酶-9

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分类号：R285(中药学)

资助基金：国家自然科学基金课题81173282;福建省科技厅资助课题2015Y0069

在线出版日期：2016-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1436-1440