免疫沉淀1,25D3-MARRS后胃黏膜提取物对成骨细胞生物学活性的影响

摘要：

目的 探讨1,25D3-MARRS(Membrane Associated,Rapid Response Steroid binding)Receptor蛋白是否参与胃黏膜提取物(EOM)对成骨细胞生物学活性的影响.方法 酶消化法培养SD大鼠新生乳鼠的成骨细胞.提取SD大鼠胃黏膜提取物,每500μg胃黏膜提取物中分别加入10 μg、1μg、0.1μg ERp57抗体(即1,25D3-MARRS抗体)、1μg正常IgG抗体进行孵育,然后分别加入50μl预洗的Protein A/G bead slurry进行免疫沉淀反应,离心去除1,25D3-MARRS-1,25D3-MARRS抗体-Protein A/G bead slurry复合物后取上清液作为高沉淀组EOM、中沉淀组 EOM、低沉淀组EOM和正常IgG组EOM,并设生理盐水和未处理组EOM干预成骨.MTT法检测0～3天成骨细胞的增殖能力.逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法检测成骨细胞I型胶原和骨钙素的表达变化.结果 在成骨细胞增殖实验中,生理盐水组低于其他5组的增殖能力(P<0.05),免疫沉淀组EOM和未处理组EOM之间无显著差别(P>0.05).I型胶原和骨钙素的表达水平在免疫沉淀1,25D3-MARRS后发生不同程度的降低.结论 免疫沉淀1,25D3-MARRS后胃黏膜提取物对成骨细胞的增殖能力无明显影响,但降低分化能力,提示可能它通过参与EOM对成骨细胞的分化作用而影响骨钙代谢.

关键词：免疫沉淀、1、25D3-MARRS、胃黏膜提取物、成骨细胞

所属期刊栏目：16

分类号：R589.5(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：广东省科技计划;工业科技攻关计划;白云区科技基金

在线出版日期：2011-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：913-919