RNA干扰沉默CTGF表达对人成骨样MG63细胞Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达的影响

摘要：

目的 本研究将利用RNA干扰技术,阻断CTGF在人成骨样MG 63细胞中的表达,观察CTGF 降表达后对人成骨样MG 63细胞Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶mRNA表达的影响.方法 针对人CTGFmRNA 440、875、910位点设计、合成3对21核苷酸siRNA(siRNA 1、siRNA 2、siRNA 3);在阳离子脂质体介导下转染人成骨样MG 63细胞,以空白及非特异性siRNA作为对照,转染48 h后收集细胞.采用Northern杂交研究CTGF mRNA表达水平的改变,半定量RT-PCR观察Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达的改变,Western blotting观察CTGF蛋白表达的变化.MTT法测定RNA干扰后人成骨样MG 63细胞活力的改变.结果 空白对照组相比,转染siRNA 1、mRNA 3的MG 63细胞CTGF mRNA和蛋白表达明显下调,转染siRNA 2及非特异性siRNA的MG 63细胞CTGF的表达无明显变化.转染siRNA 1、siRNA 3的MG63细胞Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达明显下调,细胞活力明显降低.结论 针对人CTGF mRNA设计、合成的siRNA可有效抑制人成骨样MG 63细胞CTGF的转录和表达;CTGF表达下调可抑制MG 63细胞表型标志物Ⅰ型胶原、ALP mRNA的表达,降低MG 63细胞活力,这说明CTGF可能在维持骨代谢平衡中具有重要的作用.

关键词：RNA干扰、小干扰RNA、结缔组织生长因子、Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶

所属期刊栏目：13

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金30572078;30600661

在线出版日期：2007-08-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：469-473