10.3969/j.issn.1006-7108.2006.04.009
MGP基因的重组及在大肠杆菌中的表达
目的 重组骨质疏松候选基因基质Gla蛋白(MGP)基因使其蛋白在大肠杆菌中高效表达.方法 利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)从正常人肺组织总RNA中扩增出MGP基因cDNA序列,与克隆pGEM-Teasy载体相连,测序为完整的编码序列后与表达载体pTrcHisB构建重组体,转化入大肠杆菌Top 10后用IPTG诱导,Western bloting证实蛋白表达.结果 克隆至pGEM-Teasy载体及pTrcHisB载体中的MGP基因cDNA序列与基因库完全一致.转入大肠杆菌后经IPTG诱导有蛋白的表达,Western bloting证实诱导后2、3、4 h蛋白的表达量显著增加.结论 成功重组的人MGP基因,重组体在大肠杆菌内能成功高效地表达.IPTG诱导后蛋白的表达为时间依赖性.
MGP、基因重组、蛋白表达
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R68(骨科学(运动系疾病、矫形外科学))
2006-09-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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