自噬对糖皮质激素作用下MC3T3-E1成骨细胞增殖的影响

摘要：

背景:目前,糖皮质激素(GCs)作用下成骨细胞自噬与其增殖能力的关系尚存争议.目的:探讨自噬对GCs作用下MC3T3-E1成骨细胞增殖能力的影响.方法:不同浓度(0、10-8 M、10-6 M、10-4 M)的地塞米松(DXMS)分别作用于MC3T3-E1成骨细胞,CCK-8检测不同时间(12 h、24 h、48 h)的细胞增殖能力;以Western Blot、细胞免疫荧光法检测细胞培养24 h的Beclin-1和LC-3表达水平,透射电镜法检测自噬小体数目,明确不同浓度DXMS作用下成骨细胞自噬变化特点;在10-6 M DXMS培养的成骨细胞中加入自噬激活剂雷帕霉素(RAP),以上述同样的技术检测自噬及细胞增殖能力的变化,以明确GCs作用下自噬对MC3T3-E1成骨细胞增殖能力的影响.结果:CCK-8结果示,DXMS浓度越高,对MC3T3-E1成骨细胞增殖能力的抑制作用越强,其中10-8M DXMS对细胞增殖能力无明显影响(P>0.05),10-6M DXMS对细胞增殖能力抑制较明显,10-4M DXMS对细胞增殖能力抑制作用最为明显.Western Blot、细胞免疫荧光法及透射电镜法检测结果示,随着DXMS浓度的增加,Beclin-1和LC-3B的表达水平均明显提高,自噬小体数量明显增加;在10-6M DXMS培养的成骨细胞中加入自噬激活剂RAP后,Beclin-1和LC-3B的表达水平及自噬小体数量进一步提高,而成骨细胞增殖能力变强.结论:GCs作用下自噬对成骨细胞增殖起保护作用,随着GCs浓度的增高自噬水平明显增加但相对不足,不能抵抗高浓度GCs对细胞增殖的抑制作用,提高自噬水平有助于促进成骨细胞增殖.

关键词：自噬、糖皮质激素、成骨细胞

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资助基金：国家自然科学基金;河南省科技攻关项目;国家博士后基金

在线出版日期：2021-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：144-149