慢病毒介导PTEN基因表达降低的RSC96施万细胞系模型建立

摘要：

背景:第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromo?some 10,PTEN)是一种抑癌基因,可以通过调节PI3K/AKT/mTOR等信号通路在细胞增殖凋亡中起到作用.最新研究证实,PTEN可在脊髓损伤、周围神经缺损等骨科疾病中起到重要作用,而相关的细胞模型却鲜有报道.目的:构建携载大鼠PTEN基因的慢病毒载体,建立PTEN基因表达降低的RSC96施万细胞系模型.方法:设计大鼠PTEN基因RNAi序列,将其构建并包装成可转染的慢病毒,转染RSC96施万细胞后,通过RT-PCR检测RSC96施万细胞中PTEN基因的表达情况.结果:成功构建病毒滴度为8E+8TU/ml的PTEN-RNAi慢病毒,将其转染RSC9施万细胞后,细胞中PTEN基因的相对表达量为0.2322±0.0187,敲减效率为76.78％,与阴性对照慢病毒转染组(1.0044±0.0022)相比,差异有统计学意义(P<0.01).结论:成功建立PTEN基因表达降低的RSC96施万细胞系模型,为研究PTEN基因相关的创伤骨科、脊柱外科、手外科疾病提供实验基础.

关键词：PTEN基因、RSC96施万细胞系、模型建立、慢病毒转染

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资助基金：深圳"医疗卫生三名工程"项目;广东省基础与应用基础研究基金项目;白求恩·石药骨质疏松科研基金项目;深圳市科创委资助项目

在线出版日期：2021-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：54-60