4种疟原虫核酸通用型微滴式数字PCR检测方法的建立

摘要：

目的 建立疟原虫微滴式数字PeR(droplet digital PCR,ddPCR)检测方法.方法 根据疟原虫18S rRNA基因保守序列设计特异性引物和TaqMan探针,用于ddPCR方法建立.优化ddPCR的退火温度、引物和探针浓度后,比较ddPCR和实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR,qPCR)灵敏度和重复性,并对4种疟原虫阻性样本进行检测.结果 建立的ddPCR方法特异性良好,灵敏度可达到2.3拷贝/μl,重复性良好.13份经qPCR检测的阳性样本,ddPCR检测也均为阳性,正确率达100％;5份经一个疗程青蒿素为基础的联合疗法治疗后的疟疾病人样本,qPCR检测均为阴性,ddPCR检测发现其中1份阳性(3.8拷贝/μl).结论 建立的ddPCR能够高度敏感、特异地检测人类4种疟原虫核酸.

关键词：疟原虫、微滴式数字PCR、18S rRNA

所属期刊栏目：42

分类号：R373.1+3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家质检总局科技计划项目2017IK115

在线出版日期：2020-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：381-384