伯氏疏螺旋体分型多重实时荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

目的 建立一种检测伯氏疏螺旋体的分型多重实时荧光定量PCR方法,可对3种致病基因型伽氏疏螺旋体B.garinii、阿氏疏螺旋体B.afzelii、狭义伯氏疏螺旋体B.burgdorferi sensu stricto检出并分型.方法 针对3种基因型菌株的外膜蛋白ospC基因,在保守序列设计通用引物并分别设计型特异Taqman探针,3条探针分别标记FAM、Texas Red 和CY5荧光报告基团,建立和优化多重实时荧光定量PCR反应体系,检测其敏感性和特异性.结果 建立的多重荧光定量PCR的最低检测值为B.garinii 40copies/μl、B.afzelii 5.17copies/μl和B.burgdorferi sensu stricto 37.8copies/μl,通过检测立克次体、土拉弗朗西斯菌无交叉反应,检测100只游离蜱与常规PCR结合测序结果分型一致,说明本方法有较好的灵敏性和特异性.结论 该方法能快速检测伯氏疏螺旋体并同时分型,为莱姆病的诊断提供新方法.

关键词：伯氏疏螺旋体、多重荧光定量PCR、检测

所属期刊栏目：38

分类号：R183.5(流行病学与防疫)

资助基金：国家国际科技合作专项基金;质检公益性行业科研专项

在线出版日期：2015-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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