实时荧光PCR方法检测结核分枝杆菌mRNA的研究

摘要：

目的 建立检测结核分枝杆菌mRNA表达水平的实时荧光PCR反应体系,快速鉴定结核分枝杆菌. 方法 设计合成结核分枝杆菌mRNA相应引物和探针,探针标记以JOE为报告基团,BHQ1为猝灭基团.优化反应条件,建立结核分枝杆菌mRNA的实时荧光PCR检测方法.通过检测22份肺结核患者痰液、10份健康无症状人群痰液、结核分枝杆菌标准菌株和偶然分枝杆菌菌株培养菌落,检验方法的特异性、重复性和灵敏度.结果 肺结核患者痰液检测均出现典型扩增曲线,CT均值31.35,标准差4.31.健康无症状人群痰液及偶然分枝杆菌未出现扩展曲线.对痰液标本及稀释RNA重复检测的变异系数在2.54％以下,检测CT值与痰涂片抗酸染色分枝杆菌的数量呈良好相关性.结论 建立了一种快速实时检测结核分枝杆菌mRNA基因的荧光PCR方法,具有良好的敏感性和特异性.

关键词：结核分枝杆菌、mRNA、实时荧光PCR

所属期刊栏目：37

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家质检总局科研项目;已申请国家发明专利

在线出版日期：2014-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：240-243