鼠疫耶尔森氏菌三色荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

目的 建立一种三色荧光定量PCR检测鼠疫耶尔森氏菌的方法.方法 根据鼠疫耶尔森氏菌pPCP1质粒上的pk基因、编码F1抗原在pMT1质粒上的caf1基因以及菌体染色体上的3a基因序列,设计特异性的引物和不同荧光标记的Taqman荧光探针,优化反应体系和扩增条件,考察该方法检测的敏感度、特异性、重复性和稳定性,最终建立三色荧光定量PCR检测方法.结果 本研究所建立的方法对鼠疫耶尔森氏菌DNA的扩增效率高,最低检出限为1×102 copies/ml,特异性高,重复性的变异系数在合理范围内,稳定性好.结论 建立了一种同时检测鼠疫耶尔森氏菌pla、caf1和3a基因的三色荧光定量PCR方法,该方法敏感度和特异性高,能够实现快速检测的目的.

关键词：三色荧光、定量PCR方法、鼠疫耶尔森氏菌、检测

所属期刊栏目：37

分类号：R446(诊断学)

在线出版日期：2014-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：149-153