复合探针荧光定量PCR法检测鼠疫耶尔森氏菌的实验研究
目的 建立用复合探针荧光定量PCR快速检测鼠疫耶尔森氏菌的方法.方法 研究根据鼠疫耶尔森氏菌pla基因的核苷酸序列设计特异引物,通过PCR法的特异性、灵敏度和重复性研究,建立了复合探针荧光定量PCR检测鼠疫耶尔森氏菌的方法,用于鼠疫的筛选和诊断.结果 该检测方法的特异性为100%,最低可检出10个拷贝的质粒DNA分子,可对1×101~1×106拷贝范围内的模板进行定量,最低可检测至1×102 cfu/ml细菌.该方法的精密度好,阳性质控品和阴性质控品不同时间测定3次及同一时间5次重复实验结果Cv值均<5%.结论 本研究建立的复合探针实时荧光定量PCR检测鼠疫耶尔森氏菌的方法,可对鼠疫耶尔森氏菌进行快速检测、准确辨别和早期诊断,对鼠疫的早期快速诊断具有重要意义.
复合探针、荧光定量PCR、鼠疫耶尔森氏菌
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R516.8(传染病)
国家质检总局科研基金项目20071K197
2012-04-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
430-434