贝氏柯克斯体可视化等温扩增法建立

摘要：

目的 建立针对贝氏柯克斯体的快速可视化环介导等温扩增(LAMP)方法.方法 体外合成贝氏柯克斯体的IS1111a基因,构建重组质粒.利用在线引物设计软件设计3组LAMP引物,用实时浊度仪筛选出最佳引物,同时对羟基萘酚蓝浓度进行优化,建立可视化LAMP反应体系,并评价其敏感性和特异性.结果 建立的可视化LAMP反应可准确检测出贝氏柯克斯体的重组质粒和新桥株,不与其他立克次体产生交叉反应,最低可检测到3.6×102拷贝/反应,较普通聚合酶链反应(PCR)法的灵敏度提高了一个数量级,等同于实时浊度法和实时荧光定量PCR方法的检测灵敏度.结论 建立的可视化LAMP方法可敏感、特异地检测出贝氏柯克斯体感染,操作简单快捷,适用于基层卫生防疫和疫情现场的病原筛查.

关键词：贝氏柯克斯体、环介导等温扩增、可视化

所属期刊栏目：33

分类号：R115(卫生基础科学)

资助基金：国家重大传染病防治专项2013ZX10004103,2013ZX10004218;江苏省科技支撑计划社会发展项目BE2013603;军队重点项目BWS14J025

在线出版日期：2017-09-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1219-1223