GⅠ和GⅡ型诺如病毒双重荧光RT-PCR法检测

摘要：

目的 建立应用Allglo探针同时检测GⅠ和GⅡ型诺如病毒的双重荧光反转录\聚合酶链反应(RT-PCR)方法.方法 设计针对GⅠ和GⅡ型诺如病毒开放阅读框架ORF1及ORF2为目的基因的引物和Allglo探针,优化最佳反应条件,建立一步法荧光RT-PCR快速检测反应体系；对该方法的特异性、抗干扰性、灵敏度进行评估,对96份临床粪便标本进行检测、测序分析.结果 该方法特异性强,与轮状病毒、扎如病毒、星状病毒、腺病毒同时检测无交叉反应；同一体系下GⅠ或GⅢ型诺如病毒相互之间没有干扰；最低检测限均为10 copies/μL；对96份临床粪便标本进行检测,结果与单重荧光RT-PCR方法符合率100％,且测序结果显示目标序列正确.结论 本研究建立的Allglo探针法检测GⅠ和G Ⅱ型诺如病毒技术特异性好,灵敏度高,可用于感染性腹泻暴发中诺如病毒的快速筛查.

关键词：Allglo探针、GⅠ和GⅡ型、诺如病毒、快速检测

所属期刊栏目：29

分类号：R114(卫生基础科学)

资助基金：江苏出入境检验检疫局科技计划项目2010KJ17

在线出版日期：2013-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：599-602